作者 S. CAPURRO:脂肪组织充填 – CAPURRO RESEARCH GROUP PUBBLICATION WWW.CRPUB.ORG – EDIZIONI ON LINE D’ARSONVAL - ISSN 1971-8152  – YEAR 2007 NUMBER 2 – GENOVA ITALY

脂肪组织充填
Adipofilling

From lipofilling to Adipofilling

SERGIO CAPURRO MD

Capurro Research GroupCapurro Research Group
Capurro Research Publications
sergio.capurro@fastwebnet.it

摘要

我们描述了机械破碎抽吸或手术切取脂肪组织的一种简单方法,用来得到由脂肪细胞和结缔材料组成的“充填物”。深度或极浅表的体积缺损都可以通过注射这种“生物充填物”进行矫正。采用这种术式的效果看起来随时间保持稳定。因为通过小型厨房搅拌器的脂肪机械处理粒度的标准化,这种技术(脂肪组织充填,adipofilling)有助于研究脂肪移植物的成活率,改善注射细胞移植的添加物以及细胞选择的方法。 关键词:脂肪植入,脂肪结构,脂肪组织充填(Adipofilling)

通过脂肪组织充填身体局部部位的技术一般被称为脂肪植入。近年来,这种技术已对脂肪抽吸过程中抽出的组织加以利用,并且已经在抵消包膜收缩或下垂中得到实施,在创伤性原发和继发组织缺损后的整形手术中也得到应用。AIDS治疗中的蛋白酶抑制剂经常造成继发性组织缺损。干细胞研究中的最近进展表明脂肪组织含有大量的干细胞,这是一个对医疗实践有相当重要意义的发现。
脂肪植入方面的研究主要集中在提高植入脂肪小叶的成活率,更进一步的研究领域集中在改进脂肪组织作为廉价生物充填物的使用。
建议的术式包括:通过小口径管的脂肪抽吸,离心和少量脂肪组织在很多不同部位的注射(1-2),用细眼纱布过滤新取出脂肪,用来将待移植的活组织分离,以及加入胰岛素(3)或β受体阻滞剂(4)来调节脂肪小叶移植后的脂肪分解,或加入血清(5)。

引言

脂肪组织的“小叶”并不是商品“充填物”一样在哪里都能用。移植物的小叶结构使其更难实现均匀、浅表的分布。此外,注射小叶脂肪组织的成活率不能重现,这是因为它可能受到很多因素影响:年龄、抽吸方式、组织植入位置的血管化、组织的制备、脂肪细胞的尺寸、取得组织部位的特点、移植技术、新陈代谢情况、生活习惯(如吸烟)、或者药物治疗。但是,按照我们的观点,不确定性最明显的原因仍然是注射小叶的尺寸。人们确实也确认了需要提供营养的体积越小,移植附着也将越快越牢固。在小叶较大的脂肪组织中,中心部分的细胞很容易坏死、被重新吸收或钙化。这限制了脂肪植入在隆乳术中的使用。
由浅表注射或过量注射引起的触觉或外观变化等风险也有很多的报道。这些影响看起来是由于移植小叶的尺寸过大而使移植小叶难以得到营养。为了排除这种困难,我们通过小管抽取脂肪组织,并将少量脂肪组织通过小口径管组成的若干通道移植;这包括执行重复的注射器动作。但是,这种方法创伤性非常大。为了克服这些缺点,通过用途更多或带来创伤更小的脂肪组织完成充填,我们找到了一种简单和廉价的术式,通过这种术式将脂肪抽吸得到的脂肪组织小叶或下腹壁整形术得到的切碎脂肪组织分离。得到的细胞和结缔组织可作为充填物通过18 G或更小的针管注射。

移植用材料用量的估算

和传统的脂肪植入一样,要画出供区以及待充填脂肪细胞和结缔组织的面部和/或身体部位,还必须要估算实现理想功效所需的材料数量。在充填术中,取出的脂肪小叶应比矫正所需用量多三倍。

麻醉和脂肪组织的抽取

麻醉使用改进的Klein溶液(生理溶液用乳酸林格氏液代替)进行。通过60 ml注射器和直径按照注射量确定的3、4或5 mm管子从供区抽取脂肪组织小叶。应避免使用更小直径的管子,这是因为更细的管更容易损伤吸取的组织。确信这一点根据的是几何形状方面的考虑。使用直径更大的管子意味着更少的被吸取与管壁直接接触,很明显就不太会受到与管壁的摩擦力所造成的损伤。脂肪组织小叶一经抽出后就在玻璃容器中使用乳酸格氏液洗涤。通过管子将清洗溶液从容器中吸出,重新换上新的溶液,直到溶液无色位置。通过洗涤清除了血液和利多卡因,这都是抑制葡萄糖在脂肪细胞中输送和细胞在培养环境中生长的潜在影响因素(6)。脂肪组织也可通过下腹壁整形术过程中的过量皮肤和脂肪得到。

用抽吸的脂肪组织制备细胞和结缔组织成份

通过吸脂和洗涤取得预定量(最少20 ml)的脂肪组织小叶后,将得到的材料(最多可达100 ml)倒入直径6.5 cm的250 ml的玻璃瓶中,加入50 ml的乳酸林格氏液。从脂肪中提取细胞所采用的术式包括4个或5个步骤,使用了厨房搅拌器(Philips Essence),搅拌头可在高压灭菌器中消毒(图 1)。

Fig. 1
图1 厨房搅拌器程序

每使用25次左右就需要检查搅拌器的刀片一次,如果必要则进行磨刃或更换。将通过这种方法得到的脂肪细胞和结缔组织材料(图2-3)倒在20 ml卸下推筒的注射器中。

Fig. 2
图2 用脂肪组织小叶(上方)制备脂肪细胞和结缔组织材料(下方)。

Fig. 3
图3 脂肪组织充填(adipofilling)涂片。如图所示为脂肪细胞和少量结缔组织和细小血管混合的聚集物。Hematoxylin&Eosin,放大10 x。

然后,用塑料盖(Tip guardTM,Scanlan International,美国)封住注射器,低速离心(200 g)1 min。离心后,弃去注射器底部的上清液。弃去清液后,用手指盖住注射器的开口,将推筒向上插入几毫米,将注射器底部倒转。 完成这一步后,取出的脂肪体积减少到几乎一半,因为小叶已被分为脂肪细胞和破碎的结缔组织材料。通过这个程序对脂肪处理对细胞造成的破坏极小,离心后注射器壁上没有或只有很少的液体脂肪就说明了这一点。

用下腹壁整形术的脂肪组织制备细胞和结缔组织成份

脂肪细胞和结缔组织成份还可从下腹壁整形术得到的皮下组织制得。在这种情况下,在使用搅拌器前必须将皮下组织切成小块(图4),上面提到的4个步骤组成的术式要必须进行3次。

Fig. 4
图4下腹壁整形术得到的脂肪细胞和结缔组织材料的制备

脂肪组织充填

脂肪细胞和结缔组织材料经过离心、清洗液弃去后,就可以用这种已经转变为充填物的脂肪组织来注射了。在这个阶段,如果需要可加入添加物。
注射较大体积时,使用20 ml注射器和2 mm直径的管子;注射较小体积使,使用连接管奖细胞成份移至更小的(2.5或1 ml)注射器,用18 G针头注射。可深层注射,也可仅进行真皮下的浅表注射:在注射过程中,针头必须保持运动,以避免静脉注射。注射后,可在使用充填物后即对移植区进行塑形并用手指抚平。通过外用麻醉软膏或局部麻醉可减少注射带来的痛苦:无肾上腺素的1%利多卡因渗透入真皮;不透过皮下脂肪组织。这种术式也可在全身麻醉下进行。术后恢复良好,瘀癍较轻。
脂肪组织充填可被用于几种用途:矫正乳房不对称(图5)隆乳;植入乳房假体后改善外观(图6);消除假体边缘的触感(图7);替代皮下组织损失,改善疤痕和痤疮术后的外观;垫高嘴唇的唇红部(图8);充填面部(图9、10);眼睑成形术的术后,恢复眼眶部位的年轻外观。

Fig. 5
图5 乳房不对称。右侧乳房使用220 ml、左侧乳房使用75 ml行脂肪组织充填后的效果。

Fig. 6
图6 假体乳房成形术。通过脂肪组织充填对左侧乳房上极的矫正。

Fig. 7
图7添加剂乳房成形术。通过脂肪组织充填对左侧乳房上极的矫正。通过脂肪组织充填对假体下缘和内缘可触及改变的矫正。

Fig. 8
图8唇红部脂肪组织充填后6个月的效果。

Fig. 9
9第二次面部脂肪组织充填手术后18个月的效果。共计注射85 ml。

Fig. 10
图10 面部脂肪组织充填后12个月的效果;注射90 ml

脂肪组织充填还被用于在鼻成形术后使鼻部皮肤复原,得到更加自然和对称的效果(图11),弹性悬吊除皱术,用来矫正面部不对称,恢复年轻的外观,刺激溃疡的愈合等。

Fig. 11
图11(左上)两次鼻整形术后的形态改变。(右上)鼻部右半部的外观:照片通过Adobe Photoshop复制拼合。(左下)鼻部左半部的外观:照片通过Adobe Photoshop复制拼合。(右下)脂肪组织充填后的效果。

效果

我们从2003年开始治疗了55名患者。最初治疗的患者(20%)我们低估了所需组织的用量,为了得到所需的体积在六个月后又进行了手术。没有患者需要第三次手术。总体看来,这种术式得到了非常好的效果,但是移植的成功可能因人而异,与年龄、新陈代谢状况、生活习惯(如吸烟)和药物治疗有关。在移植的冲击造成的初期水肿后,液体的重新吸收使脂肪细胞轻微收缩,但是在30天左右的时间内重新恢复到其正常的体积。在我们所有的手术中效果都保持稳定。每六个月在胸部行声学造影证实体积得到保持。脂肪植入后第一年和第二年行乳房X射线检查未发现有钙化。即使在眼睑和唇部这样的精细部位,脂肪细胞和结缔组织材料的浅表注射也未对任何患者造成可见或可触及的改变。脂肪组织充填使注射材料能够在浅表有均匀的分布,并已成功用于改善切口疤痕的外观。

讨论

用来减少所注射组织物体积的简单技术向人们展示了使用脂肪作为皮下生物“充填物”的可能性。从脂肪细胞的葡萄糖输送能力就可以看到,这种细胞有相当高的活性,葡萄糖的输送能力在基础和最高胰岛素模拟环境下都进行了测量(7)。在本研究中,脂肪细胞通过胶原蛋白消化与1 g样品分离(8-9)。将得到的细胞核结缔组织材料注射皮下。注射引起的创伤极小,即使使用18 G 针头也能进行注射。注射材料的分布很好,不需要注射器反复进行创伤性的移动来确保均匀的分布。即使材料注射在非常浅表的部位也没有继发可见或可触及改变。注射大量材料并没有并发症出现,因此便于材料的分布和塑形。没有出现钙化,分离的细胞也显示出比小叶团簇更好的成活率。脂肪组织充填的一种可能的并发症是静脉注射的风险,这种风险可通过注射过程中保持18 G针头运动来避免。而且,通过上述技术对脂肪组织的破碎能使注射材料标准化。脂肪组织充填的效果表明,各种移植物的成活、为改善注射细胞成活率所进行的试剂的选择以及细胞选择的方法有待进一步的研究。最后,上述技术依靠的是细胞群体非常简单的应用,其中包括结缔组织中含有的干细胞,并且符合再生医学的新概念。

脂肪组织充填有特别好的前途,这在于脂肪组织充填可以实现乳房或臀部体积上的改进和需要得到的外形。在面部行脂肪组织充填时,能够矫正不对称并在真皮下得到良好和完整的脂肪细胞和结缔组织层,因此使外观复原。在鼻部,脂肪组织充填矫正了鼻部整形术留下的手术人为现象(见图11),使后续的创伤和复杂手术都没有必要进行。应将目前的临床实验看作是后续研究和临床实验的起点,使其他人也可能掌握这项技术,我们对此也表示相信。

参考文献

1) Coleman SR. Facial recontouring with lipostructure. Clin. Plast. Surg. 1997; 24: 347-67
2) Coleman SR. Structural fat grafts: the ideal filler? Clin Plast Surg 2001; 28: 111-119
3)Yuksel E, Weinfeld AB, Cleek R et al. Increased free fat-graft survival with the long-term, local delivery of insulin, insulin-like growth factor-I, and basic fibroblast growth factor by PLGA/PEG microspheres. Plast Reconstr Surg 105: 1712, 2000
4) Ayhan M, Senen D, Adanalii G, Gorgu M et al: Use of beta-blockers for increasing survival of free fat grafts. Aesth Plast Surg 25: 338-242,2001
5) Capurro S., Cavalchini A.: A simple technique for bloodless surgery. Plast. Reconstr. Surg. Volume 115(3) March 2005 pp 965-966
6) Killian O, Fuhrmann R, Alt V, Noll T, Coskun S Dingeldein E, Schnettler R, Franale RP: Plasma transglutaminase factor XIII induces microvessel ingrowth into biodegradabile hydroxyapatite implants in rats. Biomaterials. 2005 May;26(14): 1819-27
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8) Bastard JP, Cuevas J, Cohen S, Jardel C, et al. Percutaneous adipose tissue biopsy by mini-liposuction for metabolic studies. J Parenteral Enteral Nutr 1994;18: 466-468
9) Kashiwagi A. Verso MA, Andrews J, el al: In vitro insulin resistance of human adipocytes isolated from subjects with non-insulin-dependent diabetes mellitus. J Clin Invest 72: 1246-1254, 1983
9) Foley JE, Kashiwagi A, Verso MA, et al: Improvement in in vitro insulin action after one month of insulin therapy in obese non-insulin-dependent diabetics. J Clin Invest 72: 1901-1909,1983

See also http://www.capurroresearch.org/Adipofilling/default.htm

作者 S. CAPURRO:脂肪组织充填 – CAPURRO RESEARCH GROUP PUBBLICATION WWW.CRPUB.ORG – EDIZIONI ON LINE D’ARSONVAL – YEAR 2007 NUMBER 2 – GENOVA ITALY